纳(na)米抗(kang)(kang)体(ti)(ti)(Nanobody,Nb), 即(ji)重(zhong)链单域(yu)抗(kang)(kang)体(ti)(ti)VHH (variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody),是由比利时科学家(jia)于1993年(nian)在(zai)自然杂志中(zhong)报道,是骆(luo)驼(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)科动(dong)物(wu)(骆(luo)驼(tuo)(tuo)(tuo)(tuo),大羊驼(tuo)(tuo)(tuo)(tuo),羊驼(tuo)(tuo)(tuo)(tuo)及(ji)其近亲物(wu)种)缺(que)失轻链的(de)天然重(zhong)链抗(kang)(kang)体(ti)(ti)的(de)可变(bian)区(VHH)组成的(de)单域(yu)抗(kang)(kang)体(ti)(ti),该抗(kang)(kang)体(ti)(ti)只包(bao)含一个重(zhong)链可变(bian)区(VHH)和两个常规的(de)CH2与CH3区。 VHH晶体(ti)(ti)为(wei)直径2.5nm、长4nm的(de)圆(yuan)柱(zhu)体(ti)(ti),分子(zi)量只有15 KDa,因(yin)此也(ye)被称作纳(na)米抗(kang)(kang)体(ti)(ti)(Nanobody, Nb)。
图(tu)片来源:International Journal of Nanomedicine 2016:11 3287–3303
得(de)益(yi)于纳(na)米抗(kang)(kang)(kang)(kang)体微(wei)小(xiao)的结构、完整的抗(kang)(kang)(kang)(kang)原识别(bie)能力以及噬菌体筛选(xuan)技术,纳(na)米抗(kang)(kang)(kang)(kang)体表现(xian)出(chu)高(gao)亲(qin)合力、高(gao)特(te)异性(xing)、强穿透性(xing)和(he)易于基(ji)因改造和(he)表达等特(te)点,并且由(you)于可以获得(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)体完整序列(lie),纳(na)米抗(kang)(kang)(kang)(kang)体可以通过(guo)体外重组表达高(gao)质(zhi)量稳(wen)定生产,有效避(bi)免传(chuan)统抗(kang)(kang)(kang)(kang)体的批(pi)次间差(cha)异问题。纳(na)米抗(kang)(kang)(kang)(kang)体的物理和(he)化学(xue)稳(wen)定性(xing),可为诊(zhen)断和(he)治疗(liao)提供新(xin)的研究工(gong)具,在抗(kang)(kang)(kang)(kang)体药物研发、医(yi)学(xue)基(ji)础(chu)研究以及疾(ji)病诊(zhen)断、癌症和(he)感染性(xing)疾(ji)病治疗(liao)等领域展现(xian)出(chu)了广(guang)阔(kuo)的应(ying)用(yong)前景。
与靶点结合(he)特异性(xing)更(geng)强
组织穿透力更强
开(kai)发周(zhou)期短(duan),稳(wen)定性更高
制备简(jian)单(dan),适合工业(ye)化大规模生产
可在(zai)微生物(wu)中高效大量表达(da)
更容易人源化
耀海生(sheng)(sheng)物拥有丰(feng)富的(de)(de)纳(na)米(mi)抗(kang)体(ti)研发及(ji)生(sheng)(sheng)产(chan)经验,以强大的(de)(de)技术平台、先进(jin)的(de)(de)生(sheng)(sheng)产(chan)设备以及(ji)在纳(na)米(mi)抗(kang)体(ti)全(quan)生(sheng)(sheng)态表(biao)达(da)系(xi)统(tong)的(de)(de)开创性技术,致力于为客(ke)户提供从菌株构建(jian)、多(duo)功能纳(na)米(mi)抗(kang)体(ti)表(biao)达(da)与纯化(hua),及(ji)规模化(hua)生(sheng)(sheng)产(chan)的(de)(de)一站(zhan)式纳(na)米(mi)抗(kang)体(ti)研发生(sheng)(sheng)产(chan)服务(wu),满足客(ke)户不同实验或项目需求。
目前,耀海生物建立了全生态的纳米抗体表达体系,现有的表达系统包括:E.coli 原核表(biao)达(da)系统、酵母表(biao)达(da)系统(毕赤酵母)、哺乳(ru)动物细胞表(biao)达(da)系统(科研级样品制备),熟练(lian)运用多种(zhong)表(biao)达(da)宿(su)主菌(jun),根据客户的实际需求,为客户提供适(shi)合且(qie)高质量(liang)的表(biao)达(da)体系。
大肠(chang)杆(gan)菌表(biao)达(da)系(xi)统是基因(yin)表(biao)达(da)技术中发展(zhan)早、应用广且经济(ji)实(shi)惠的经典(dian)表(biao)达(da)系(xi)统。大肠(chang)杆(gan)菌具有遗传背(bei)景(jing)清楚、细胞增殖快、表(biao)达(da)量(liang)高(gao)、稳定性好和抗(kang)污染能力强等(deng)特点。
纳米抗体的(de)分子质(zhi)量(liang)小、结构简(jian)单(dan),能被单(dan)个(ge)基因(yin)编码,利用基因(yin)工(gong)程(cheng)能在大(da)肠杆(gan)菌等(deng)原核微生物(wu)中大(da)量(liang)表达。
耀海生物可以(yi)利用(yong)大肠(chang)杆菌在胞质或者(zhe)通过信(xin)号(hao)肽周(zhou)质空间表达(da)纳米抗体,成(cheng)功表达(da)的纳米抗体种(zhong)类(lei)超20种(zhong)。
酵母(mu)表达系统,是工(gong)业生产中(zhong)应用较(jiao)为广泛(fan)的(de)(de)系统,其遗传(chuan)背景清楚安全,兼具原核和(he)真核表达系统的(de)(de)优点:增殖快、可在(zai)廉价(jia)培(pei)养基中(zhong)进行高密度发酵、能(neng)进行复杂的(de)(de)翻译(yi)后(hou)修饰、且分泌(mi)表达能(neng)力强大,有(you)效降低下游(you)纯(chun)化成本(ben)。纳米抗体的(de)(de)分子质量小(xiao)、结构简单(dan)(dan),能(neng)被(bei)单(dan)(dan)个基因(yin)编(bian)码,利用基因(yin)工(gong)程能(neng)在(zai)酵母(mu)菌等微生物(wu)中(zhong)大量表达。
耀海生物可(ke)提(ti)供纳米(mi)抗(kang)体高表(biao)达菌株的筛选与发酵工艺开发服务(wu),采用(yong)高密(mi)度发酵,利用(yong)毕赤酵母PAOX1诱导表(biao)达纳米(mi)或PGAP组(zu)成(cheng)型(xing)表(biao)达10余(yu)种不同纳米(mi)抗(kang)体,表(biao)达量(liang)可(ke)达到(dao)10 g/L以上。
哺乳动物(wu)(wu)细胞表(biao)达(da)(da)系统(tong)能够指导蛋(dan)白质的(de)正(zheng)确折(zhe)叠,提(ti)供复(fu)杂的(de)N型(xing)糖(tang)基化(hua)和准确的(de)O型(xing)糖(tang)基化(hua)等多种翻译后加工(gong)功(gong)能,因而(er)表(biao)达(da)(da)产(chan)物(wu)(wu)在分子结构(gou)、理化(hua)特性和生(sheng)物(wu)(wu)学功(gong)能方面(mian),接近于天然的(de)高等生(sheng)物(wu)(wu)蛋(dan)白质分子。
耀海生物可(ke)(ke)(ke)利(li)用哺乳动物细胞CHO系(xi)列(lie)细胞,通(tong)过瞬(shun)转方法或构建(jian)稳转株来表(biao)达(da)(da)多(duo)种(zhong)不(bu)同纳米抗(kang)体(ti)。利(li)用CHO系(xi)列(lie)细胞瞬(shun)转表(biao)达(da)(da)纳米抗(kang)体(ti),表(biao)达(da)(da)量可(ke)(ke)(ke)达(da)(da)20mg/L;利(li)用CHO系(xi)列(lie)细胞稳转株表(biao)达(da)(da)纳米抗(kang)体(ti),表(biao)达(da)(da)量可(ke)(ke)(ke)达(da)(da)15mg/L。
由(you)客户提(ti)供纳米(mi)抗体基因序(xu)列或氨基酸序(xu)列,自(zi)主选(xuan)择表达宿(su)主细胞,耀海生物(wu)提(ti)供从基因合成至纳米(mi)抗体表达与(yu)纯化、及规模化生产的(de)一站式纳米(mi)抗体研发生产服务。
步骤 | 服务内容 | 周期 | 交付 |
纳米抗体表达工程菌构建(可以选择毕赤酵母,大肠杆菌或者哺乳动物细胞) | 1.大肠杆菌表达系统(tong)(胞质(zhi)或周质(zhi)空间表达) 2.毕赤酵(jiao)母(mu)表(biao)(biao)达(da)系统(tong)(可以选用甲醇诱导型表(biao)(biao)达(da)系统(tong)PAOX1或者组成型表(biao)(biao)达(da)系统(tong)PGAP) 3.哺乳动物表达(da)系(xi)统(通过瞬(shun)转或者稳转来表达(da)纳米抗体(ti)) |
大肠杆菌1-2周(不包括基因合成周期) 毕赤酵母2-3周 哺乳动物瞬转1-2周 稳转株2个月左右 |
纯化得到的纳米抗体,纯化抗体检测报告SDS-PAGE,SEC-HPLC(选做)、RP-HPLC(选做)和CE-SDS(选做)纯度分析方法 |
小量表达纯化(标签) | 对构建的工程菌纳米抗体表达,对1L表达体积的蛋白进行纯化(推荐加标签)。 | 2-3周 | |
大规模表达纯化 | 大规模发酵纳米抗体样品,同时对于发酵的纳米抗体进行表达纯化。 | 5-8周 |
成熟(shu)的纳米(mi)抗体表达纯化平台,以丰富的技术及项目(mu)经验,提供(gong)一(yi)站式服务。
强大的(de)技术服(fu)(fu)务(wu)团队,具(ju)备丰富生物学技术背景,以(yi)博士为(wei)主导(dao)的(de)表达纯化平台,提供一(yi)(yi)对一(yi)(yi)专项技术服(fu)(fu)务(wu)。
具备稳定的原核细胞E.Coli 、真核毕赤(chi)酵(jiao)母及哺乳(ru)动(dong)物细(xi)胞(bao)CHO等(deng)纳米抗(kang)体(ti)表达平台,客户(hu)可根据需求灵活选择(ze)表达平台,减(jian)少试错成本(ben)。
具备(bei)深厚纳米抗(kang)体质量评价体系(xi)经验(yan),建立SDS-PAGE、SEC-HPLC、RP-HPLC及基于毛细管电泳的CE-SDS等(deng)多种(zhong)纯度分析方法。
丰(feng)富纳米抗体纯化经验(yan),积累(lei)亲和层析、离(li)子(zi)层析、疏水层析等(deng)多种(zhong)纯化方式(shi),可(ke)对不同纯化方案(an)灵(ling)活(huo)组(zu)合(he),实现纯度(du)≥98%。
可提供7-2000L的服务规模。
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商(shang)务(wu)热线:0523-86285566(转8810)
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