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納米抗體

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納米抗體

納米抗體(ti)(ti)(ti)(Nanobody,Nb), 即重鏈(lian)單(dan)域(yu)(yu)抗體(ti)(ti)(ti)VHH (variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody),是(shi)由比利(li)時(shi)科學家于1993年(nian)在自然雜(za)志中報道(dao),是(shi)駱駝科動物(駱駝,大(da)羊(yang)駝,羊(yang)駝及其近親物種)缺失輕(qing)鏈(lian)的(de)天然重鏈(lian)抗體(ti)(ti)(ti)的(de)可變(bian)區(VHH)組成的(de)單(dan)域(yu)(yu)抗體(ti)(ti)(ti),該抗體(ti)(ti)(ti)只(zhi)包含一個重鏈(lian)可變(bian)區(VHH)和兩(liang)個常規的(de)CH2與CH3區。 VHH晶體(ti)(ti)(ti)為直徑2.5nm、長4nm的(de)圓柱體(ti)(ti)(ti),分子量只(zhi)有(you)15 KDa,因此也被稱作(zuo)納米抗體(ti)(ti)(ti)(Nanobody, Nb)。

圖片(pian)來(lai)源:International Journal of Nanomedicine 2016:11 3287–3303

納米抗體特點

得益(yi)于納(na)(na)米抗(kang)(kang)體(ti)(ti)微小的(de)(de)(de)結構、完整(zheng)(zheng)的(de)(de)(de)抗(kang)(kang)原識別(bie)能力以及噬菌體(ti)(ti)篩選技術,納(na)(na)米抗(kang)(kang)體(ti)(ti)表現(xian)出(chu)高(gao)親合(he)力、高(gao)特異(yi)性(xing)(xing)(xing)、強穿(chuan)透性(xing)(xing)(xing)和(he)(he)易于基因改造(zao)和(he)(he)表達等特點(dian),并且由于可以獲得抗(kang)(kang)體(ti)(ti)完整(zheng)(zheng)序列,納(na)(na)米抗(kang)(kang)體(ti)(ti)可以通過體(ti)(ti)外重組表達高(gao)質量穩(wen)定(ding)生(sheng)產,有(you)效(xiao)避免傳統抗(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)(de)批(pi)次間差異(yi)問題。納(na)(na)米抗(kang)(kang)體(ti)(ti)的(de)(de)(de)物(wu)理(li)和(he)(he)化學穩(wen)定(ding)性(xing)(xing)(xing),可為診斷(duan)和(he)(he)治療提供(gong)新(xin)的(de)(de)(de)研(yan)究(jiu)工具,在抗(kang)(kang)體(ti)(ti)藥物(wu)研(yan)發、醫學基礎研(yan)究(jiu)以及疾(ji)病診斷(duan)、癌(ai)癥和(he)(he)感染性(xing)(xing)(xing)疾(ji)病治療等領域展現(xian)出(chu)了廣闊(kuo)的(de)(de)(de)應(ying)用前景。

  • 與靶點結(jie)合(he)特異性更強

  • 組織穿透力更強

  • 開發周期短,穩(wen)定性更高(gao)

  • 制備簡單,適合工業化大規(gui)模(mo)生產(chan)

  • 可(ke)在微生物(wu)中高效(xiao)大量表達

  • 更容易人源化

納米抗體研發技術加速服務平臺

耀海生(sheng)(sheng)物擁有豐富的(de)納(na)(na)米(mi)抗(kang)(kang)體(ti)研發及(ji)生(sheng)(sheng)產(chan)經驗(yan),以強(qiang)大的(de)技術平臺、先進的(de)生(sheng)(sheng)產(chan)設備以及(ji)在納(na)(na)米(mi)抗(kang)(kang)體(ti)全生(sheng)(sheng)態表(biao)達(da)系統的(de)開創性技術,致力于為客(ke)戶提供從菌(jun)株(zhu)構建、多功能納(na)(na)米(mi)抗(kang)(kang)體(ti)表(biao)達(da)與(yu)純化,及(ji)規模化生(sheng)(sheng)產(chan)的(de)一站式納(na)(na)米(mi)抗(kang)(kang)體(ti)研發生(sheng)(sheng)產(chan)服(fu)務(wu),滿足客(ke)戶不(bu)同實(shi)驗(yan)或項目需求。

  • 全生態重組表達系統

    E.coli 原核表達系統
    酵母真核表達系統(畢赤酵母)
    哺乳動物細胞表(biao)達(da)系(xi)統

  • 多樣化納米抗體類型

    單域(yu)納米(mi)(mi)(mi)抗體、二價納米(mi)(mi)(mi)抗體、多價納米(mi)(mi)(mi)抗體

  • 成熟完善純化平臺

    齊全(quan)純(chun)化(hua)平臺,組合式純(chun)化(hua)方式,高效靈活

  • μg至kg

    納米抗體較高表達量10g/L
    服務規模7-2000L

目前,耀海生物建立了全生態的納米抗體表達體系,現有的表達系統包括:E.coli 原核表(biao)達(da)(da)系統(tong)、酵母(mu)表(biao)達(da)(da)系統(tong)(畢赤(chi)酵母(mu))、哺乳動物細胞(bao)表(biao)達(da)(da)系統(tong)(科研級樣(yang)品(pin)制備(bei)),熟練運(yun)用多種表(biao)達(da)(da)宿(su)主(zhu)菌,根據客戶(hu)的實際需求,為(wei)客戶(hu)提(ti)供適(shi)合且高質量的表(biao)達(da)(da)體系。

20+品(pin)質開發經驗積累(lei)
不同大腸桿(gan)菌宿(su)主靈活選擇(ze)
不同表達載體高(gao)效(xiao)選擇
10+品種開(kai)發(fa)經(jing)驗(yan)儲備(bei)
不同畢赤酵母宿主靈(ling)活(huo)選(xuan)擇(ze)
PAOX1甲醇誘導(dao)表(biao)達系統
PGAP組成型表達(da)系統
5+品種(zhong)納米抗體開發經驗
瞬轉表達納米抗體
穩轉株表達納米抗(kang)體
E.coli 原核表達系統
酵母表達系統(畢赤酵母)
哺乳動物細胞表達系統
E.coli 原核表達系統

大腸(chang)桿菌(jun)表達(da)(da)系(xi)統(tong)是基(ji)因表達(da)(da)技術中(zhong)發展早、應(ying)用廣且經(jing)濟實惠的(de)經(jing)典表達(da)(da)系(xi)統(tong)。大腸(chang)桿菌(jun)具有遺傳背景清楚、細(xi)胞增殖(zhi)快、表達(da)(da)量高、穩定性好和抗污染能力強(qiang)等特點。

納米抗體(ti)的分(fen)子質量小、結(jie)構(gou)簡單(dan),能被單(dan)個基因(yin)編碼,利(li)用基因(yin)工程能在大(da)腸桿菌等(deng)原核微生物中大(da)量表達。

耀(yao)海生物可以利用(yong)大(da)腸桿菌在(zai)胞質(zhi)或者(zhe)通過信號(hao)肽周質(zhi)空間(jian)表達(da)(da)納(na)米抗體,成功表達(da)(da)的納(na)米抗體種(zhong)類超(chao)20種(zhong)。

酵母表達系統(畢赤酵母)

酵(jiao)母表(biao)(biao)達(da)系統,是工業生(sheng)產中應用(yong)較為廣泛(fan)的(de)(de)系統,其遺傳(chuan)背(bei)景清(qing)楚安全,兼具原核和(he)真(zhen)核表(biao)(biao)達(da)系統的(de)(de)優點:增殖(zhi)快、可在廉(lian)價(jia)培養(yang)基(ji)中進行(xing)高密(mi)度發酵(jiao)、能(neng)進行(xing)復雜的(de)(de)翻譯后修飾、且(qie)分(fen)泌表(biao)(biao)達(da)能(neng)力(li)強大,有效降低下游純化成本。納(na)米抗體的(de)(de)分(fen)子質量小、結構簡單,能(neng)被單個基(ji)因編碼,利用(yong)基(ji)因工程能(neng)在酵(jiao)母菌(jun)等微生(sheng)物中大量表(biao)(biao)達(da)。

耀(yao)海生物(wu)可提供納米(mi)抗體高表達菌株的篩選(xuan)與發酵工(gong)藝(yi)開發服務(wu),采用(yong)高密(mi)度發酵,利用(yong)畢赤酵母PAOX1誘導(dao)表達納米(mi)或PGAP組成型表達10余種不同納米(mi)抗體,表達量可達到(dao)10 g/L以(yi)上(shang)。

哺乳動物細胞表達系統

哺乳動物細胞表達系統能夠指導蛋白質(zhi)的正(zheng)確折疊(die),提供復雜的N型(xing)糖基化和(he)準確的O型(xing)糖基化等(deng)多種翻譯后加工功能,因而表達產物在分子結構、理化特(te)性和(he)生(sheng)(sheng)物學功能方面,接近于天然的高等(deng)生(sheng)(sheng)物蛋白質(zhi)分子。

耀海生物(wu)(wu)可利用哺乳動物(wu)(wu)細(xi)胞(bao)CHO系列細(xi)胞(bao),通過(guo)瞬轉(zhuan)方法或構建穩轉(zhuan)株來表(biao)(biao)達(da)(da)多種不同納米抗(kang)體(ti)(ti)。利用CHO系列細(xi)胞(bao)瞬轉(zhuan)表(biao)(biao)達(da)(da)納米抗(kang)體(ti)(ti),表(biao)(biao)達(da)(da)量可達(da)(da)20mg/L;利用CHO系列細(xi)胞(bao)穩轉(zhuan)株表(biao)(biao)達(da)(da)納米抗(kang)體(ti)(ti),表(biao)(biao)達(da)(da)量可達(da)(da)15mg/L。

納米抗體表達服務內容

由客戶提供(gong)納(na)米抗體(ti)基因序列(lie)或(huo)氨基酸(suan)序列(lie),自(zi)主選擇表達宿主細胞,耀海生(sheng)(sheng)物提供(gong)從基因合成至納(na)米抗體(ti)表達與純化、及規模化生(sheng)(sheng)產(chan)的一站式納(na)米抗體(ti)研發生(sheng)(sheng)產(chan)服務。

步驟 服務內容 周期 交付
納米抗體表達工程菌構建(可以選擇畢赤酵母,大腸桿菌或者哺乳動物細胞)


1.大腸桿菌(jun)表達系統(胞質或周(zhou)質空間表達)


2.畢赤酵母表達(da)系統(可以選(xuan)用甲(jia)醇誘導(dao)型表達(da)系統PAOX1或者(zhe)組成(cheng)型表達(da)系統PGAP)


3.哺乳動(dong)物表達(da)(da)系統(通過瞬轉(zhuan)或者(zhe)穩轉(zhuan)來表達(da)(da)納米抗(kang)體)


大腸桿菌1-2周(不包括基因合成周期)
畢赤酵母2-3周
哺乳動物瞬轉1-2周 穩轉株2個月左右
純化得到的納米抗體,純化抗體檢測報告SDS-PAGE,SEC-HPLC(選做)、RP-HPLC(選做)和CE-SDS(選做)純度分析方法
小量表達純化(標簽) 對構建的工程菌納米抗體表達,對1L表達體積的蛋白進行純化(推薦加標簽)。 2-3周
大規模表達純化 大規模發酵納米抗體樣品,同時對于發酵的納米抗體進行表達純化。 5-8周
服務優勢
  • 經驗豐富

    成(cheng)熟的納(na)米抗體表達純化平臺,以豐富的技術及(ji)項目經驗,提供一(yi)站式服(fu)務。

  • 專家團隊

    強大的技(ji)術服(fu)務團隊(dui),具備豐富生(sheng)物學技(ji)術背(bei)景,以博(bo)士為主導(dao)的表達純化平臺,提供一(yi)對一(yi)專項(xiang)技(ji)術服(fu)務。

  • 全域表達平臺

    具備穩定的原核細胞E.Coli 、真核畢赤酵(jiao)母及哺乳動物細胞CHO等納米抗體表(biao)達平臺,客戶可根據需(xu)求靈活選擇表(biao)達平臺,減少試錯成本。

  • 完備質量體系

    具備(bei)深厚納米(mi)抗體(ti)質(zhi)量(liang)評價體(ti)系經驗,建立SDS-PAGE、SEC-HPLC、RP-HPLC及基于毛(mao)細管電(dian)泳的CE-SDS等多(duo)種純度分析方法。

  • 高效捕獲純化體系

    豐(feng)富納米抗體純化經驗,積累親和層析、離子(zi)層析、疏(shu)水層析等多種純化方(fang)式,可對(dui)不同純化方(fang)案靈活組合,實現純度≥98%。

  • 大規模生產

    可(ke)提供(gong)7-2000L的服務規模。

服務案例
利用微表達生產不同納米抗體
服務案例
利用微生物表達不同納米抗體
利用畢赤酵母表達一價納米抗體
利用畢赤酵母表達二價納米抗體
利用畢赤酵母表達三價納米抗體
納米抗體純化體系
服務案例
納米抗體純化體系
通過對protein A親核層析,對納米抗體進行純化。
根據PAGE膠檢測結果,純化得到納米抗體純度為90%以上。
通過對離子層析,對納米進行純化。
根據PAGE膠檢測結果,純化得到納米抗體純度為95%以上。
納米抗體質量評價體系
服務案例
利用微生物生產不同納米抗體
通過SDS-PAGE、SEC-HPLC對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到95%以上。
通過SEC-HPLC對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到99%以上。
通過CE-SDS對純化的納米抗體進行分析,納米抗體純度可以達到98%以上。
定制服務-在線詢價
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