Yaohai Bio-Service | 高效质粒工艺开发平台，赋能加速新药创新

质粒是细胞、基因和疫苗治疗的重要工具。无论裸(luo)质(zhi)(zhi)粒(li)还是(shi)包(bao)装(zhuang)病毒载体，最终都是(shi)将质(zhi)(zhi)粒(li)携(xie)带(dai)的目的基(ji)因(yin)导入息细胞，达到治疗或预防(fang)疾病的目的。作为关键起始材(cai)料，高(gao)质(zhi)(zhi)量(liang)、高(gao)纯度(du)的超螺旋质(zhi)(zhi)粒(li)是(shi)确(que)保裸(luo)质(zhi)(zhi)粒(li)、AAV和(he)LV等基(ji)因(yin)载体安全有(you)效的前提条(tiao)件。

质粒的生产工艺步骤

• 质粒(li)DNA骨架的构建

• 质(zhi)粒DNA转(zhuan)化至(zhi)感(gan)受态(tai)细胞，筛选克隆及建立研究用菌种(zhong)库（RCB）

• 建(jian)立用于(yu)生产的主细胞库及工作(zuo)细胞库

• 菌种复苏及(ji)上游发酵(jiao)生产（获得足够量(liang)的质粒DNA发酵(jiao)液）

• 下游(you)纯(chun)化（去除产品及工艺相关杂质）

• 分装(zhuang)获(huo)得超螺(luo)旋质粒(li)DNA（可用(yong)于病毒(du)载体包装(zhuang)，质粒(li)DNA疫苗，细胞治(zhi)疗产品的转(zhuan)导(dao)基因(yin)修饰系(xi)统等）

• 限制性内(nei)切酶酶切获得线性化质粒(li)（作为mRNA转录模板的原材料(liao)时需(xu)要(yao)该步骤(zhou)）

耀(yao)海(hai)(hai)生物质(zhi)粒DNA工(gong)(gong)艺(yi)开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)服(fu)务(wu)团队秉持质(zhi)量源于设(she)计（QbD）的理念(nian)，根据菌(jun)种特性(xing)与(yu)质(zhi)粒超螺旋比(bi)例等关键(jian)质(zhi)量标准(zhun)建立稳健可(ke)放大的小试工(gong)(gong)艺(yi)。耀(yao)海(hai)(hai)质(zhi)粒DNA工(gong)(gong)艺(yi)开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)平(ping)(ping)台(tai)涵(han)盖质(zhi)粒构(gou)建、菌(jun)种构(gou)建与(yu)优(you)势菌(jun)筛(shai)选等构(gou)建与(yu)筛(shai)选服(fu)务(wu)。我们在(zai)工(gong)(gong)艺(yi)开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)平(ping)(ping)台(tai)下为(wei)客户(hu)项目提(ti)供定(ding)制(zhi)化小试级(ji)别发(fa)(fa)(fa)(fa)酵与(yu)纯(chun)化工(gong)(gong)艺(yi)开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)、制(zhi)剂工(gong)(gong)艺(yi)开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)服(fu)务(wu)，并(bing)同时为(wei)客户(hu)项目提(ti)供分析方法开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)与(yu)预验证(zheng)(zheng)等原(yuan)液(ye)(ye)/制(zhi)剂全流(liu)程开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)服(fu)务(wu)。耀(yao)海(hai)(hai)质(zhi)粒DNA工(gong)(gong)艺(yi)开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)平(ping)(ping)台(tai)可(ke)满足质(zhi)粒DNA（原(yuan)液(ye)(ye)与(yu)制(zhi)剂）的工(gong)(gong)艺(yi)开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)、工(gong)(gong)艺(yi)优(you)化、工(gong)(gong)艺(yi)表征(zheng)、工(gong)(gong)艺(yi)验证(zheng)(zheng)和方法学开(kai)(kai)发(fa)(fa)(fa)(fa)需求。

耀海生物

质粒发酵工艺平台

耀海生物通过优化基础培养基、补料培养基和发酵控制策略，建立了适用于质粒生产的大肠杆菌高密度发酵平台工艺，培养周期30h内，质粒产量超过1g/L。

此(ci)外(wai)，耀海生(sheng)物能够针对不同的质(zhi)(zhi)粒和宿(su)主(zhu)菌(jun)，基于单因素或(huo)DoE方(fang)法提供工(gong)艺优(you)化解决(jue)方(fang)案，定(ding)制化满足质(zhi)(zhi)粒高产量、高质(zhi)(zhi)量需求。

耀海生(sheng)物1 g/L质粒发酵(jiao)工艺(yi)

耀海生物

发酵工艺平台介绍

耀海(hai)生物基于实验设(she)计（DoE）等(deng)方(fang)法学(xue)，能够快速实现不(bu)同分子的定制化(hua)工(gong)艺开发和优化(hua)。我们专(zhuan)注(zhu)于微(wei)生物重组蛋白、质(zhi)粒(li)DNA的工(gong)艺开发，针对大肠杆菌、酵母建立了高产量的平台工(gong)艺，欢迎垂询：19952981076

大肠杆菌包涵体产量：最高可达10g/L以上

大肠杆菌可溶性蛋白产量：最高可达5g/L以上

酵母胞外分泌蛋白含量：最高可达30g/L以上

耀海生物

纯化工艺平台介绍

发酵收获(huo)(huo)的(de)菌体中(zhong)除质(zhi)粒(li)(li)DNA外，还包含大(da)量的(de)宿(su)主蛋白(HCP)、宿(su)主DNA(HCD)、宿(su)主RNA、内毒素(su)等工艺过(guo)程残留。因此需(xu)针对质(zhi)粒(li)(li)DNA的(de)理化(hua)(hua)特性，设计与开发稳(wen)健可放(fang)大(da)的(de)纯化(hua)(hua)工艺，获(huo)(huo)得符合(he)超(chao)螺旋(xuan)质(zhi)粒(li)(li)纯度、杂质(zhi)残留要求的(de)质(zhi)粒(li)(li)DNA原液。适用于(yu)质(zhi)粒(li)(li)DNA大(da)规(gui)模生产的(de)纯化(hua)(hua)方案如下：离(li)心或过(guo)滤(lv)收菌、碱(jian)裂解中(zhong)和、澄清过(guo)滤(lv)、超(chao)滤(lv)换液、凝胶过(guo)滤(lv)去除RNA、嗜硫亲和层(ceng)析捕获(huo)(huo)超(chao)螺旋(xuan)质(zhi)粒(li)(li)、阴离(li)子柱(zhu)去除内毒素(su)等。

作为微生(sheng)(sheng)物(wu)表达体系(xi)CRDMO行业领跑者，耀(yao)(yao)海生(sheng)(sheng)物(wu)工(gong)艺开(kai)发(fa)(fa)团(tuan)队秉持(chi)质(zhi)(zhi)量源(yuan)于设计(QbD)的(de)(de)(de)理(li)念。我(wo)们科(ke)学地考量质(zhi)(zhi)粒DNA的(de)(de)(de)生(sheng)(sheng)理(li)生(sheng)(sheng)化特性和关键质(zhi)(zhi)量属性(CQA)，利用OFAT单因素或DoE快速(su)优(you)化过滤/裂解(jie)/超滤/层析等纯化工(gong)艺参(can)数。耀(yao)(yao)海生(sheng)(sheng)物(wu)已针(zhen)对不同序列、不同长度的(de)(de)(de)超螺旋(xuan)质(zhi)(zhi)粒开(kai)发(fa)(fa)出(chu)满足产(chan)品(pin)性能、可稳定放大的(de)(de)(de)纯化工(gong)艺。

耀海生物

质粒工艺平台服务优势

•成熟的优势菌筛选平台

耀海(hai)平台提(ti)供高通量、多宿主类型的大肠杆(gan)菌优势菌筛选服务，单批可(ke)筛选100+候选菌株(zhu)。

•高通量快速开发平台

耀海平台基于DoE和平行性实验系统(tong)，高通量筛选发酵(jiao)、纯(chun)化、制剂工艺或处方(fang)。我们可满足不同长度(du)质(zhi)粒DNA的表达量、纯(chun)度(du)、杂质(zhi)残留等开(kai)发目(mu)标，同时高度(du)契(qi)合(he)生产放大需求(qiu)。

•分析方法开发平台

根据(ju)不(bu)同特性(xing)的质(zhi)粒(li)DNA，我们针对(dui)性(xing)开发最适合的质(zhi)量分析(xi)方(fang)法；同时配(pei)合工艺路线完成关键项质(zhi)量检测，涵盖生化、理化等。

•合规性保障平台

我(wo)们全(quan)面评估工艺过程(cheng)与(yu)质量(liang)标准的合(he)规(gui)性，如宿(su)主来(lai)源、无动物源、抗生素类型、毒性或致敏性、纯度、工艺过程(cheng)残留等，全(quan)流程(cheng)符合(he)法规(gui)申报需(xu)求。

•丰富的质粒开发经验

耀海团(tuan)队(dui)具备多质(zhi)粒项目开发(fa)经验(yan)，针(zhen)对线性化/超螺旋(xuan)质(zhi)粒开发(fa)稳健可放大的小试(shi)工艺。以期助力裸质(zhi)粒、AAV、mRNA等细胞与(yu)基因治(zhi)疗产品的产业化进程。

•CDMO一站式服务平台支撑

基于超(chao)十(shi)年的多品种(zhong)生(sheng)产(chan)(chan)(chan)及服(fu)务经(jing)验(yan)，耀海生(sheng)产(chan)(chan)(chan)团队全流程提供生(sheng)产(chan)(chan)(chan)经(jing)验(yan)技术支持。工(gong)艺开发(fa)团队贯彻(che)产(chan)(chan)(chan)业化理念，能够保证(zheng)小试工(gong)艺高度契合生(sheng)产(chan)(chan)(chan)需(xu)求。