Yaohai Bio-Service | 高效质粒工艺开发平台，赋能加速新药创新

質粒是細胞、基因和疫苗治療的重要工具。無論裸質(zhi)粒還是(shi)包裝(zhuang)病毒載體，最終(zhong)都是(shi)將質(zhi)粒攜帶的目(mu)的基因導入息細胞，達到治(zhi)療或預防(fang)疾病的目(mu)的。作為關鍵起始(shi)材料，高(gao)質(zhi)量、高(gao)純度的超螺旋質(zhi)粒是(shi)確保裸質(zhi)粒、AAV和(he)LV等基因載體安全(quan)有效的前提條件。

質粒的生產工藝步驟

? 質粒DNA骨(gu)架的構建(jian)

? 質粒DNA轉(zhuan)化至感(gan)受態細胞，篩選克隆及(ji)建立研究用菌種庫（RCB）

? 建立用(yong)于生產的主細胞庫(ku)及(ji)工作細胞庫(ku)

? 菌種復蘇及上游發酵生產（獲得(de)足夠量的質粒(li)DNA發酵液）

? 下游純(chun)化(hua)（去除產品及(ji)工藝相關雜質）

? 分裝獲(huo)得超(chao)螺旋質粒DNA（可用于病毒載體包裝，質粒DNA疫苗，細胞治(zhi)療產品的轉導(dao)基因(yin)修飾系統等）

? 限制(zhi)性內切酶酶切獲得線性化質(zhi)粒（作為mRNA轉錄模板的原材料時需要該步驟）

耀(yao)海(hai)生(sheng)物質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)DNA工(gong)(gong)(gong)(gong)藝開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)服(fu)(fu)務(wu)(wu)團隊秉持(chi)質(zhi)(zhi)(zhi)量源于設計（QbD）的(de)理念，根據菌種(zhong)特性與質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)超(chao)螺旋比例等關鍵質(zhi)(zhi)(zhi)量標準建(jian)立穩健可放大的(de)小試(shi)(shi)工(gong)(gong)(gong)(gong)藝。耀(yao)海(hai)質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)DNA工(gong)(gong)(gong)(gong)藝開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)平臺涵蓋質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)構(gou)(gou)建(jian)、菌種(zhong)構(gou)(gou)建(jian)與優勢菌篩(shai)選(xuan)等構(gou)(gou)建(jian)與篩(shai)選(xuan)服(fu)(fu)務(wu)(wu)。我們在(zai)工(gong)(gong)(gong)(gong)藝開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)平臺下(xia)為(wei)客(ke)(ke)戶項(xiang)目提(ti)(ti)供定制(zhi)(zhi)化(hua)小試(shi)(shi)級別發(fa)(fa)(fa)(fa)酵與純化(hua)工(gong)(gong)(gong)(gong)藝開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)、制(zhi)(zhi)劑工(gong)(gong)(gong)(gong)藝開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)服(fu)(fu)務(wu)(wu)，并同時為(wei)客(ke)(ke)戶項(xiang)目提(ti)(ti)供分析方(fang)法開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)與預驗證(zheng)等原液(ye)/制(zhi)(zhi)劑全流程開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)服(fu)(fu)務(wu)(wu)。耀(yao)海(hai)質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)DNA工(gong)(gong)(gong)(gong)藝開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)平臺可滿足質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)DNA（原液(ye)與制(zhi)(zhi)劑）的(de)工(gong)(gong)(gong)(gong)藝開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)、工(gong)(gong)(gong)(gong)藝優化(hua)、工(gong)(gong)(gong)(gong)藝表征、工(gong)(gong)(gong)(gong)藝驗證(zheng)和方(fang)法學開(kai)(kai)(kai)發(fa)(fa)(fa)(fa)需(xu)求。

耀海生物

質粒發酵工藝平臺

耀海生物通過優化基礎培養基、補料培養基和發酵控制策略，建立了適用于質粒生產的大腸桿菌高密度發酵平臺工藝，培養周期30h內，質粒產量超過1g/L。

此外，耀海生物能夠(gou)針對不同(tong)的質(zhi)粒(li)和宿(su)主菌(jun)，基于單(dan)因(yin)素或DoE方(fang)法提供工藝(yi)優化(hua)解(jie)決方(fang)案，定制化(hua)滿足質(zhi)粒(li)高(gao)產量(liang)、高(gao)質(zhi)量(liang)需求。

耀海(hai)生物1 g/L質(zhi)粒發酵工藝

耀海生物

發酵工藝平臺介紹

耀海生物(wu)(wu)基于(yu)實驗設計（DoE）等方法學，能夠快速實現不(bu)同(tong)分子的定制(zhi)化(hua)工(gong)藝(yi)開(kai)(kai)發和優化(hua)。我們專注于(yu)微生物(wu)(wu)重組蛋白、質粒DNA的工(gong)藝(yi)開(kai)(kai)發，針對大腸桿菌、酵(jiao)母建立了高產量的平臺工(gong)藝(yi)，歡迎(ying)垂詢：19952981076

大腸桿菌包涵體產量：最高可達10g/L以上

大腸桿菌可溶性蛋白產量：最高可達5g/L以上

酵母胞外分泌蛋白含量：最高可達30g/L以上

耀海生物

純化工藝平臺介紹

發(fa)酵收獲(huo)的(de)菌(jun)體中除質(zhi)(zhi)粒DNA外，還包含(han)大(da)量的(de)宿(su)主(zhu)蛋白(HCP)、宿(su)主(zhu)DNA(HCD)、宿(su)主(zhu)RNA、內毒素等工(gong)藝過(guo)程(cheng)殘留。因此需針對(dui)質(zhi)(zhi)粒DNA的(de)理(li)化特性，設計(ji)與開發(fa)穩健可放(fang)大(da)的(de)純(chun)化工(gong)藝，獲(huo)得符合超螺旋(xuan)(xuan)質(zhi)(zhi)粒純(chun)度、雜質(zhi)(zhi)殘留要求的(de)質(zhi)(zhi)粒DNA原(yuan)液。適用于(yu)質(zhi)(zhi)粒DNA大(da)規模生產的(de)純(chun)化方(fang)案如下(xia)：離(li)心或過(guo)濾(lv)收菌(jun)、堿裂(lie)解中和(he)、澄清過(guo)濾(lv)、超濾(lv)換液、凝(ning)膠過(guo)濾(lv)去除RNA、嗜硫親和(he)層(ceng)析捕(bu)獲(huo)超螺旋(xuan)(xuan)質(zhi)(zhi)粒、陰離(li)子柱(zhu)去除內毒素等。

作為微生物表達體系CRDMO行業領跑者(zhe)，耀海生物工藝(yi)開(kai)發團(tuan)隊秉持質(zhi)量源于設計(QbD)的(de)(de)(de)理念。我們科學(xue)地考量質(zhi)粒(li)DNA的(de)(de)(de)生理生化特性(xing)(xing)和(he)關(guan)鍵質(zhi)量屬性(xing)(xing)(CQA)，利用OFAT單因素或DoE快(kuai)速優化過濾/裂解/超濾/層(ceng)析(xi)等純(chun)化工藝(yi)參數。耀海生物已針(zhen)對不同序列、不同長度的(de)(de)(de)超螺旋質(zhi)粒(li)開(kai)發出滿足產品性(xing)(xing)能、可穩定放大的(de)(de)(de)純(chun)化工藝(yi)。

耀海生物

質粒工藝平臺服務優勢

?成熟的優勢菌篩選平臺

耀海平臺(tai)提供高通量、多宿主類型(xing)的大腸桿菌(jun)(jun)優勢菌(jun)(jun)篩(shai)選服務，單批可(ke)篩(shai)選100+候選菌(jun)(jun)株。

?高通量快速開發平臺

耀海平臺基于DoE和(he)平行性實驗系統，高(gao)通(tong)量(liang)篩選(xuan)發酵、純(chun)化、制劑(ji)工藝或(huo)處方。我們可滿足(zu)不(bu)同長(chang)度(du)質粒(li)DNA的(de)表達量(liang)、純(chun)度(du)、雜(za)質殘留等開發目標，同時(shi)高(gao)度(du)契合生(sheng)產放大需(xu)求(qiu)。

?分析方法開發平臺

根據(ju)不同特性(xing)的(de)質粒DNA，我(wo)們針對(dui)性(xing)開發最適合的(de)質量分(fen)析方(fang)法；同時配合工藝路線(xian)完成關鍵項質量檢測，涵蓋生(sheng)化、理化等。

?合規性保障平臺

我們全(quan)面評估工藝過程(cheng)(cheng)與質量(liang)標(biao)準的合規(gui)性(xing)，如宿(su)主(zhu)來源、無動物源、抗生素類型、毒性(xing)或致敏性(xing)、純度、工藝過程(cheng)(cheng)殘留等，全(quan)流程(cheng)(cheng)符(fu)合法規(gui)申(shen)報需求。

?豐富的質粒開發經驗

耀海團隊具備多質粒項目開發經驗，針對線性化(hua)/超螺旋質粒開發穩健可放大的小試工藝。以期助力裸質粒、AAV、mRNA等細胞(bao)與基因治療產(chan)品的產(chan)業化(hua)進程。

?CDMO一站式服務平臺支撐

基(ji)于超十年的多(duo)品種生(sheng)產(chan)(chan)(chan)及服務經(jing)驗，耀(yao)海(hai)生(sheng)產(chan)(chan)(chan)團隊全流程(cheng)提供(gong)生(sheng)產(chan)(chan)(chan)經(jing)驗技術支(zhi)持。工藝(yi)開發團隊貫徹產(chan)(chan)(chan)業化理念，能夠保(bao)證小試工藝(yi)高度契合生(sheng)產(chan)(chan)(chan)需(xu)求(qiu)。